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16.4 Kd/MM kinetics 题

Kd:

  • Kd = [P][L]/[PL]。
  • Kd 小,binding 强。
  • 90% bound 近似需要 [L]free = 9Kd,但 high [P] 时要考虑 mass balance。

MM:

  • 读 Vmax plateau。
  • Km 是 half-maximal velocity 对应的 [S]。
  • kcat = Vmax/[E]T。
  • 比较 enzyme efficiency 常用 kcat/Km。

Kd 和 MM kinetics 都是 equilibrium/kinetic thinking,但含义不同。Kd 描述 binding equilibrium;Km 来自 enzyme kinetic model,常与 substrate concentration at half Vmax 相关。

做题时先判断问的是 binding 还是 catalysis。binding 问 fraction bound、Kd、ligand concentration;enzyme kinetics 问 v、Vmax、Km、kcat、kcat/Km。混用公式是高频错误。

  • 原文小点: Kd = [P][L]/[PL]。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。
  • 原文小点: Kd 小,binding 强。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。
  • 原文小点: 90% bound 近似需要 [L]free = 9Kd,但 high [P] 时要考虑 mass balance。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。
  • 原文小点: 读 Vmax plateau。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。
  • 原文小点: Km 是 half-maximal velocity 对应的 [S]。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。
  • 原文小点: kcat = Vmax/[E]T。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。
  • 原文小点: 比较 enzyme efficiency 常用 kcat/Km。
    • 讲解: 这个小点是 Kd/MM kinetics 题型;先区分 binding equilibrium 和 enzyme velocity,再选公式。

binding: Kd=[P][L]/[PL],90% bound 需 [L]free=9Kd。enzyme: v=kcat[E]T[S]/(Km+[S]),kcat=Vmax/[E]T,efficiency=kcat/Km。

  • 只背定义,不解释结构如何导致功能。
  • 答题时缺少“因为…所以…”的因果链。